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En el interior de la mansión propiedad del multimillonario Bruce Wayne (George Clooney) se vive un periodo de honda preocupación. Por una parte, el fiel sirviente y amigo de Wayne, el veterano Alfred Pennyworth (Michael Gough) sufre una extraña enfermedad que está a punto de conducirle a las puertas de la muerte.

Mientras tanto, se hace evidente el distanciamiento entre Batman y su protegido Robin, álias de Dick Grayson (Chris O'Donnell). La causa de esta situación de progresiva enemistad se debe a la suerte de hechizo llevado a cabo por la enigmática veneno Ivy (Uma Thurman), mano derecha del doctor Victor Fries (Arnold Schwarzenegger) durante su cometido profesional y aliada de Mr. Freeze en su convencimiento de sembrar el «mal» en Gotham City.

Para contrarestar la actuación destructiva de veneno Ivy, dispuesta a elaborar plantas manipuladas genéticamente que alcancen tamaños gigantescos, y de Mr. Freeze, consagrado a crear un estado de permanente invierno en la ciudad donde habita el hombre murciélago, Batgirl (Alicia Silverstone), la guapa sobrina de Alfred, se une a Batman y a Robin en su particular cruzada contra los villanos que acechan Gothan City.